sds page蛋白电泳只有maker跑出带了,样品颜色很深看不出带是怎么回事

来源：学生作业帮编辑：搜搜做题作业网作业帮分类：化学作业时间：2024/08/06 17:47:15

一般这种情况是上样量太大的缘故,你做PAGE之前有对样品蛋白进行初步定量麽?SDS-PAGE对上扬的蛋白量是有要求的,上样过大就会跑成一片看不到条带.
再问：会不会是loading buffer放的太多，样品太少？
再答：不会，因为loading buffer会跑在最前沿而成为一条蓝色的细线，那条细线最后在染色前是要求切掉的。此外样品太少的的话，如果脱色时间够长也会看到有微弱的条带。
再问：确实很微弱 OTL特别微弱样品的整条带颜色和marker蛋白带颜色差不多，所以样品蛋白看不清，特别模糊
再答：还是那句话，你应该在电泳前对蛋白进行初步定量，最简单的就是用分光光度计测280nm的吸光度，按照小牛血清蛋白的标准曲线对浓度进行初步定量（每0.6OD的吸光度为1mg/ml）。然后再上合适的样品上去。如果你实在是没办法获得理想浓度的蛋白的话，那么建议换染色方法，使用灵敏度更高的银染法。

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