细胞传代的具体过程是什么?
来源:学生作业帮 编辑:搜搜做题作业网作业帮 分类:生物作业 时间:2024/07/28 13:42:27
细胞传代的具体过程是什么?
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1.紫外线提前20-30min打开;
2.关紫外灯,开灯,通气,点燃酒精灯;
3.检查细胞生长状况;显微镜下观察各浓度下细胞生长状况(数量、形态、透.亮度、贴壁情况);用酒精棉对培养瓶外部进行擦拭.
4.将培养基倒掉,加PBS冲洗一下,如不需传代,加入5ml新鲜培养基即可;
5.传代:加1.5ml 0.1%Trp PBS冲洗一下(快速);
6.加入3滴左右0.1%Trp PBS,37℃1分钟,轻敲瓶壁使大部分细胞脱落,加入3n(n为传代瓶数)ml培养基(DMEM);
7.用吸管轻柔吹打,尽量让细胞均匀分散开来,各取出3ml至新瓶中;
8 .放入CO2培养箱(培养条件5% CO2、饱和湿度、37℃ )
这个是我做实验的时候用的protocol
看是否对你有所帮助~欢迎追问~
2.关紫外灯,开灯,通气,点燃酒精灯;
3.检查细胞生长状况;显微镜下观察各浓度下细胞生长状况(数量、形态、透.亮度、贴壁情况);用酒精棉对培养瓶外部进行擦拭.
4.将培养基倒掉,加PBS冲洗一下,如不需传代,加入5ml新鲜培养基即可;
5.传代:加1.5ml 0.1%Trp PBS冲洗一下(快速);
6.加入3滴左右0.1%Trp PBS,37℃1分钟,轻敲瓶壁使大部分细胞脱落,加入3n(n为传代瓶数)ml培养基(DMEM);
7.用吸管轻柔吹打,尽量让细胞均匀分散开来,各取出3ml至新瓶中;
8 .放入CO2培养箱(培养条件5% CO2、饱和湿度、37℃ )
这个是我做实验的时候用的protocol
看是否对你有所帮助~欢迎追问~