双酶切鉴定（或者测序）是否含有目的基因的时候,为何用pMD18-T载体?

来源：学生作业帮编辑：搜搜做题作业网作业帮分类：生物作业时间：2024/07/07 07:40:24

双酶切鉴定（或者测序）是否含有目的基因的时候,为何用pMD18-T载体?
过程主要是：
从小麦胚胚芽鞘中提出总的RNA,反转录cDNA,然后纯化cDNA,特异性PCR扩增,电泳,得到目的基因,然后连接载体pMD18-T上,再进行双酶切鉴定（或者测序）
希望解释清楚点,我知道pMD18-T载体是克隆载体,但是不知道与我的问题有没有关.

通常先分析一下目的基因上存在哪些常见的酶切位点,
再选择合适的克隆载体.保证你双酶切的位点在目的基因上不会出现.
PMD18-T克隆位点两侧的酶切位点比较多,很常用的.

双酶切鉴定（或者测序）是否含有目的基因的时候,为何用pMD18-T载体? TAKARA的PMD18-T载体可以用哪个通用引物验证?用了TAKARA的PMD18-T载体转入了目的片段,想用PCR验我已经有含有目的基因的T质粒了,怎样构建表达载体啊? 标记基因和目的基因是连在一起的吗?如何用标记基因筛选目的基因载体? 如何用标记基因筛选含有目的基因的细胞标记基因,书上说作用是为了鉴定受体一般是否含有目的基因如何用标记基因检测目的基因导入载体构建载体的时候,先用设计好的引物PCR所要的目的基因,再和T载体连接,再转化,再小抽,再双酶切,再和导入含有目的基因的质粒的大肠杆菌繁殖后后代是否含有目的基因? 生物选修3……标记基因,书上说作用是为了鉴定受体一般是否含有目的基因；在目的基因导入受体细胞后还要用含有目的基因的克隆载体打入生物体内,是如何表达蛋白的呢? 有别人构建好的含有目的基因的表达载体质粒,但是只知道目的基因的mRNA序列,如何做PCR检测目的基因?