WB转膜后清晰看到Marker在膜上,再用5%的BSA封闭,一抗过夜,二抗室温一个小时,显影定影后胶片一片空白?
来源:学生作业帮 编辑:搜搜做题作业网作业帮 分类:综合作业 时间:2024/07/23 03:09:14
WB转膜后清晰看到Marker在膜上,再用5%的BSA封闭,一抗过夜,二抗室温一个小时,显影定影后胶片一片空白?
是不是抗体浓度这一步骤出现问题了?小弟万分感激!
是不是抗体浓度这一步骤出现问题了?小弟万分感激!
以前也出现过这种情况,问题不清楚,因为这里的太多可能出错的地方了
1)就像你说的抗体浓度问题,不过我觉得这里问题不是太大
2)你检测的东西的浓度问题,如果表达很低的话,曝光时间久要长了,但是你显影之后一点都没有的话,就有问题了.
3)ecl反应液有没问题?
4)曝光的时候的那张膜与胶片之间有没压紧?
做WB的时候最好是有正负对照,现在的有曝光的Marker,你可以买点试试~
1)就像你说的抗体浓度问题,不过我觉得这里问题不是太大
2)你检测的东西的浓度问题,如果表达很低的话,曝光时间久要长了,但是你显影之后一点都没有的话,就有问题了.
3)ecl反应液有没问题?
4)曝光的时候的那张膜与胶片之间有没压紧?
做WB的时候最好是有正负对照,现在的有曝光的Marker,你可以买点试试~
WB转膜后清晰看到Marker在膜上,再用5%的BSA封闭,一抗过夜,二抗室温一个小时,显影定影后胶片一片空白?
WB加完发光液暗室里可见整张膜都发光,是为什么呀?膜用百分之五的BSA封闭过夜的!
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免疫共沉淀,4°摇床封闭过夜.我平时做WB,都是直接4°封闭过夜,不用摇床,做IP的时候必须要摇床吗?
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