包涵体蛋白超声裂解后,通过离心能将细胞碎片去除吗,怎样的方法能得到比较纯的包涵体可以进行称量计算
来源:学生作业帮 编辑:搜搜做题作业网作业帮 分类:生物作业 时间:2024/07/25 07:57:07
包涵体蛋白超声裂解后,通过离心能将细胞碎片去除吗,怎样的方法能得到比较纯的包涵体可以进行称量计算
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梯度离心或者差速离心去除细胞碎片,一般1000r/min左右就差不多可以达到效果.包涵体是表达过快的蛋白来不及折叠而形成的蛋白团,所以一般蛋白纯度能够达到95%以上,用6M盐酸胍就基本把包涵体分开,再超滤一下加上缓冲液就基本上很纯了
再问: 梯度离心,用什么,差速离心包涵体在沉淀里还是上层,包涵体和细胞的碎片重量差别会很大吗
再答: 一般是蔗糖吧。包涵体是在沉淀里面,和细胞膜之类的膜结构以及一些多糖结构来说,包涵体蛋白的比重肯定要大得多,不过,具体离心的效果还得参照跑胶的结果进行改进。
再问: 用蔗糖梯度离心一般能达到多少的纯度
再问: 梯度离心,用什么,差速离心包涵体在沉淀里还是上层,包涵体和细胞的碎片重量差别会很大吗
再答: 一般是蔗糖吧。包涵体是在沉淀里面,和细胞膜之类的膜结构以及一些多糖结构来说,包涵体蛋白的比重肯定要大得多,不过,具体离心的效果还得参照跑胶的结果进行改进。
再问: 用蔗糖梯度离心一般能达到多少的纯度
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