考马斯亮蓝法测蛋白质时为什么浓度越高而吸光度越低
来源:学生作业帮 编辑:搜搜做题作业网作业帮 分类:生物作业 时间:2024/08/14 22:08:09
考马斯亮蓝法测蛋白质时为什么浓度越高而吸光度越低
我在用考马斯亮蓝测定透明质酸中的蛋白质时,吸光度还没有空白样的吸光度高,指针向反方向打,有时会出现浓度越高而吸光度越低,带入标准方程中为负数,麻烦你们能告诉我该怎么办?
在做标准曲线时没问题,可是在测样品时,就会出现吸光度为负数的问题 糖胺聚糖怎么去除
我在用考马斯亮蓝测定透明质酸中的蛋白质时,吸光度还没有空白样的吸光度高,指针向反方向打,有时会出现浓度越高而吸光度越低,带入标准方程中为负数,麻烦你们能告诉我该怎么办?
在做标准曲线时没问题,可是在测样品时,就会出现吸光度为负数的问题 糖胺聚糖怎么去除
透明质酸中的蛋白质指的是一种蛋白聚糖中的蛋白质吗,是否应该考虑除去其中的糖胺聚糖,将蛋白质纯化,因为考马斯亮蓝需要与蛋白质结合才能显色,样品中的糖胺聚糖可能有影响,或者是样品污染
考马斯亮蓝溶液应为酸性,并且变成蓝绿色是就不能再使用了
实验时一定要最后加入蛋白质溶液,
另外,样品中的Tris、乙酸、2-巯基乙醇、EDTA等物质对实验结果有少量颜色干扰,可以在做标准曲线时可以用缓冲液代替蒸馏水,就可以将干扰扣除,
但是大量的去污剂如SDS对颜色的影响太大不容易去除,只能想办法从样品中去除去污剂,
考马斯亮蓝溶液应为酸性,并且变成蓝绿色是就不能再使用了
实验时一定要最后加入蛋白质溶液,
另外,样品中的Tris、乙酸、2-巯基乙醇、EDTA等物质对实验结果有少量颜色干扰,可以在做标准曲线时可以用缓冲液代替蒸馏水,就可以将干扰扣除,
但是大量的去污剂如SDS对颜色的影响太大不容易去除,只能想办法从样品中去除去污剂,
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