蛋白酶K在什么温度下酶活性最大?需要多长时间?加多少量合适?
来源:学生作业帮 编辑:搜搜做题作业网作业帮 分类:生物作业 时间:2024/07/11 15:28:29
蛋白酶K在什么温度下酶活性最大?需要多长时间?加多少量合适?
![蛋白酶K在什么温度下酶活性最大?需要多长时间?加多少量合适?](/uploads/image/z/4924033-25-3.jpg?t=%E8%9B%8B%E7%99%BD%E9%85%B6K%E5%9C%A8%E4%BB%80%E4%B9%88%E6%B8%A9%E5%BA%A6%E4%B8%8B%E9%85%B6%E6%B4%BB%E6%80%A7%E6%9C%80%E5%A4%A7%3F%E9%9C%80%E8%A6%81%E5%A4%9A%E9%95%BF%E6%97%B6%E9%97%B4%3F%E5%8A%A0%E5%A4%9A%E5%B0%91%E9%87%8F%E5%90%88%E9%80%82%3F)
蛋白酶K,是一种切割活性较广的丝氨酸蛋白酶.它切割脂族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽键.此酶经纯化去除了RNA酶和DNA酶活性.由于蛋白酶K在尿素和SDS中稳定,还具有降解天然蛋白质的能力,因而它应用很广泛,包括制备脉冲电泳的染色体DNA,蛋白质印迹以及去除DNA和RNA制备中的核酸酶.
蛋白酶K的一般工作浓度是50—100μg/ml.
在较广的pH范围内(pH 4-12.5)均有活性.
推荐反应缓冲液:50mM Tris-HCl (pH7.5),10mM CaCl2 .
孵育温度为55至65℃,理想孵育温度为58℃,孵育时间为15分钟至48小时;理想孵育时间为2小时
蛋白酶K的一般工作浓度是50—100μg/ml.
在较广的pH范围内(pH 4-12.5)均有活性.
推荐反应缓冲液:50mM Tris-HCl (pH7.5),10mM CaCl2 .
孵育温度为55至65℃,理想孵育温度为58℃,孵育时间为15分钟至48小时;理想孵育时间为2小时