做免疫荧光实验观察蛋白质亚细胞定位需要多少标本量
来源:学生作业帮 编辑:搜搜做题作业网作业帮 分类:生物作业 时间:2024/07/13 19:46:13
做免疫荧光实验观察蛋白质亚细胞定位需要多少标本量
是像免疫组化一样需要很多标本才可以吗?
是像免疫组化一样需要很多标本才可以吗?
童鞋这个问题有一点奇怪哦(我不知道你是否其实想问的是抗体等试剂的用量).
你所说的免疫荧光实验,标本应该是细胞.理论上来说细胞的数量只要能够覆盖显微镜最低倍数的视野就可以了.实际上染色的当然要比一个视野多很多,才能选取质量好的图像.一般来说,12-13毫米直径的玻片刚好能够放进24孔板,是做免疫荧光常用的大小.这个面积上面种多少细胞,同你的细胞类型及其单个细胞大小有关.做免疫荧光的话,细胞不应该长得太密.我估计你每个样本有几万个细胞就够了.
再问: 我想用石蜡切片观察,不是用细胞,所以不知道需要切多少切片才够
再答: 在切片用量的方面,免疫荧光和免疫组化是没有区别的。 如果是单个蛋白质的染色,理论上来说就是每组一个空白对照切片和一个实际染色切片。如果需要做定量分析,每组最好有3-5个样本。然后总切片数主要同楼主的实验设计有多少个组有关。
你所说的免疫荧光实验,标本应该是细胞.理论上来说细胞的数量只要能够覆盖显微镜最低倍数的视野就可以了.实际上染色的当然要比一个视野多很多,才能选取质量好的图像.一般来说,12-13毫米直径的玻片刚好能够放进24孔板,是做免疫荧光常用的大小.这个面积上面种多少细胞,同你的细胞类型及其单个细胞大小有关.做免疫荧光的话,细胞不应该长得太密.我估计你每个样本有几万个细胞就够了.
再问: 我想用石蜡切片观察,不是用细胞,所以不知道需要切多少切片才够
再答: 在切片用量的方面,免疫荧光和免疫组化是没有区别的。 如果是单个蛋白质的染色,理论上来说就是每组一个空白对照切片和一个实际染色切片。如果需要做定量分析,每组最好有3-5个样本。然后总切片数主要同楼主的实验设计有多少个组有关。
做免疫荧光实验观察蛋白质亚细胞定位需要多少标本量
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