持家基因和目的基因退火温度相差很大,怎么跑定量PCR啊?
来源:学生作业帮 编辑:搜搜做题作业网作业帮 分类:综合作业 时间:2024/08/18 12:23:47
持家基因和目的基因退火温度相差很大,怎么跑定量PCR啊?
2个方案,第一个,重新设计一个引物,可以加长引物长度来增加退火温度.
第二个,分成两锅跑PCR,轻松就搞定.
新手?这个问题本身就不是问题,好多定量引物都是公司设计的,长度啥的都考虑好了,而且定量引物一般很短,PCR长度很短,特异性非常强,退火温度相差不会太大,即使很大,也很有希望能够找到合适温度一起跑能出的.
第二个,分成两锅跑PCR,轻松就搞定.
新手?这个问题本身就不是问题,好多定量引物都是公司设计的,长度啥的都考虑好了,而且定量引物一般很短,PCR长度很短,特异性非常强,退火温度相差不会太大,即使很大,也很有希望能够找到合适温度一起跑能出的.
PCR怎么获得目的基因
做RT-PCR时,上下引物退火温度一定要一样吗?内参条带很亮,为什么没有目的基因?
做荧光定量PCR和半定量PCR有什么区别?半定量的PCR退火温度和荧光定量PCR是一样的吗?
请问荧光定量PCR进行相对定量时,若是目的基因和内参基因扩增效率不一致,为什么会导致结果的不准确?
怎么筛选目的基因,做PCR验证?
请教 做染料法荧光定量PCR,熔解曲线分析,如何区分目的基因产物和引物二聚体呢?
pcr退火温度怎么确定?
第一次做荧光定量PCR,内参基因能够跑出来,而且溶解曲线也比较好,但是目的基因完全跑不出来
半定量rt pcr内参和目的基因的引物加的量相同吗,能否放在同一管中跑PCR
PCR技术检测目的基因
荧光定量pcr扩得出目的基因但是检测不到内参gapdh
内参基因与目的基因的Ct值相差很大是什么原因