用primer 5.0 设计引物的时候,哪个才是真正的PCR产物退火温度
来源:学生作业帮 编辑:搜搜做题作业网作业帮 分类:综合作业 时间:2024/07/25 00:58:56
用primer 5.0 设计引物的时候,哪个才是真正的PCR产物退火温度
Tm,看哪个?
![](http://img.wesiedu.com/upload/2/5c/25c65946628fb68dc74af6dba0b34cad.jpg)
Tm,看哪个?
![](http://img.wesiedu.com/upload/2/5c/25c65946628fb68dc74af6dba0b34cad.jpg)
![用primer 5.0 设计引物的时候,哪个才是真正的PCR产物退火温度](/uploads/image/z/12754450-10-0.jpg?t=%E7%94%A8primer+5.0+%E8%AE%BE%E8%AE%A1%E5%BC%95%E7%89%A9%E7%9A%84%E6%97%B6%E5%80%99%2C%E5%93%AA%E4%B8%AA%E6%89%8D%E6%98%AF%E7%9C%9F%E6%AD%A3%E7%9A%84PCR%E4%BA%A7%E7%89%A9%E9%80%80%E7%81%AB%E6%B8%A9%E5%BA%A6)
第四项,Tm【℃】,三行分别是正义引物,反义引物和PCR产物的退火温度.
再问: 这我知道,在PCR的时候退火温度应该选哪个?
再答: 当然是看引物的了。设的时候应该让两条引物Tm值尽量接近,要是没办法选择,PCR的时候就选低一点的好了。反正我现在一般都先用54度先扩一遍,这个温度是很温和的,一般都能扩增出来。要是特异性不好,有杂带,再升高温度,要是扩不出来,再降低温度。经常软件给出来的温度实际做的时候会有出入的。
再问: 这我知道,在PCR的时候退火温度应该选哪个?
再答: 当然是看引物的了。设的时候应该让两条引物Tm值尽量接近,要是没办法选择,PCR的时候就选低一点的好了。反正我现在一般都先用54度先扩一遍,这个温度是很温和的,一般都能扩增出来。要是特异性不好,有杂带,再升高温度,要是扩不出来,再降低温度。经常软件给出来的温度实际做的时候会有出入的。
用primer 5.0 设计引物的时候,哪个才是真正的PCR产物退火温度
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