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胶回收纯化后克隆测序找不到我所用的引物是怎么回事啊

来源:学生作业帮 编辑:搜搜做题作业网作业帮 分类:综合作业 时间:2024/07/12 17:48:56
胶回收纯化后克隆测序找不到我所用的引物是怎么回事啊
我是用10bpRAPD随机引物和模板扩增得到的特异性条带回收纯化,再克隆测序的,可是拿到的测序结果为什么找不到我随机引物序列呢?是不是测序结果有问题
胶回收纯化后克隆测序找不到我所用的引物是怎么回事啊
你是克隆到T载体上的吗?你回收的片段有多大?有可能是测序结果里面不包含你的引物段.要知道,测序结果8,9百bp后面的结果都是不准确的.
再问: 是到T载体上的,片段大约是600bp
再答: 这样呀,那你再送个克隆过去试试,用T载体的通用引物测通,最好双向都测一下,看引物序列还在不在。如果你是用自己的引物测的话,由于测序结果最前面几个也是不准的,所以可能会和你的引物不一致。