如果提取的DNA中含有蛋白质和RNA污染,应如何解决
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/07/29 06:18:46
我不知道什么叫达到做分离原则,是指分离原理还是指分离达到某项条件才算分离开来了吗?请补充说明下.酶专一性嘛,可以选用与半胱氨酸的巯基反应的化学试剂封闭这个基团,及选用合适的化学试剂对酶进行化学修饰.在
B噬菌体的DNA注入细菌,进行3次复制之后,两条DNA双链变成16条链,8个噬菌体.而原来的两条链分布在两个子代噬菌体中,所以占四分之一噬菌体的蛋白质不进入细菌当中,所以含有35S的噬菌体分别占子代噬
提DNA那一步的话都没区别,就是破碎分离提取,区别在于纯化上,像寄生虫肯定是选择个体,然后取样提取,细菌病毒的话都是提取纯化然后再取样做DNA.
选A.因为纤维素是植物细胞(属于真核细胞)细胞壁的主要成分B小白鼠组织,动物细胞组成C噬菌体,也叫细菌病毒,无细胞构造D乳酸菌,属于细菌,是原核细胞
蛋白污染会在电泳孔有亮带,跑不出来.RNA污染会在最下边,一团弥散的亮带,但DNA如果降解的话也有这种现象.
A、洗涤剂作用于细胞膜上的蛋白质,进而瓦解细胞膜,但对DNA没有影响,A错误;B、DNA不溶于酒精,蛋白质等其它杂质溶解于酒精,可使得DNA析出,B错误;C、洗涤红细胞的目的是去除杂蛋白,有利于后续步
会有的.因为噬菌体完成复制、合成自身所需的原料都来源于细菌.
不一样的,禽类是从红细胞中提取DNA的,但是哺乳动物确实从白细胞中提取的,因为哺乳动物的红细胞中没有细胞核.
蛋白质的合成要DNA作为指导!DNA的复制也要蛋白质来辅助完成!
取出少量样品用特异性酶切,检查大分子是否还在(uv或者电泳),确认.用紫外分光光度计扫描,计算A260/A280之比值,如果大于1.8说明RNA污染,如果小于1.8有蛋白污染.(原理这里不讲了太费时间
质粒DNA提取一般用沸水浴法和碱裂解法,现在一般都采用碱裂解法,并有试剂盒可用,它主要是将细胞内的环状质粒提取出来,一般需要用SDS裂解,RNA酶降解,然后过柱,再进行洗脱.过程比较简单.而基因组DN
我的教训是加酒精时要慢一点,过滤时要多过滤几次,不然会剩余大量蛋白质,影响结果.
酚氯仿反复抽提两次,既可有效的去除蛋白质残留.
带GSTtag的蛋白体外分离纯化时,GSTpulldown过程中,只有带GST的融合蛋白可以特异结合到柱子上,核酸等杂质都随流出液流走了,不会干扰你的实验结果.
DNA的中文名称是脱氧核糖核酸,就其结构来说,是由脱氧核糖、磷酸、碱基(A.G.C.T)三部分构成的,是不含蛋白质的.但是,染色质(或称染色体)是含有蛋白质的.
主要成分是:NaCl,Tris-HCl(PH=8),EDTA(PH=8),SDS.NaCl,Tris-HCl主要是调节溶液的PH,维持一定的离子浓度hjEDTA主要是二价金属离子的螯合剂3173使影响
蛋白污染可以考虑用酚氯仿多抽提几次,记得吸上清的时候小心点,宁可浪费也别吸到界面.一般后续还需要用氯仿/异戊醇抽提来去除酚.这样基本蛋白污染就可以去干净.实在不行,抽提一次后,就用蛋白酶K消化30mi
提取的时候饱和酚,氯仿需要定量,这些可以去蛋白.去除RNA污染,RNA酶活性,定量.凝胶电泳,试剂最好是即用型的,因为有些东西放久了会长菌.然后是染料的热稳定性和灵敏度.
在T2噬菌体的化学组分中~60%是蛋白质,40%是DNA~其中~硫仅存在于蛋白质分子中,99%的磷都存在于DNA分子中~第一~T2噬菌体蛋白质中含P量少~不影响实验结果~第二~找不到另一种更好的标记元
我用过CTAB法提取植物叶片DNA,会得到叶片中所有的DNA,总DNA里当然包括叶绿体和线粒体DNA,使用这种模板可以进行叶绿体和线粒体基因组上的扩增,我以前做过TRNL_F这个基因的扩增,用的就是C