RACE的原理是什么?它对获得目的基因有何帮助?
来源:学生作业帮 编辑:搜搜做题作业网作业帮 分类:综合作业 时间:2024/07/15 06:15:05
RACE的原理是什么?它对获得目的基因有何帮助?
我对这块越看越糊涂了.辛苦了
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一楼说的对,2楼说的只是5‘RACE,一楼说的3‘5’都包括了.同样建议看商品化产品的步骤,例如takara3‘full race kit.
再问: 如果我获得全长CDNA了,如何克隆目的基因啊?????辛苦指教
再答: 那你就需要将这全长用PCR的方法扩增出来,然后采用某种克隆手段将它克隆至某一载体中。 具体有这么三种,一是TA克隆,就是用Taq酶扩增之后直接连到T载体。二是酶切位点克隆,就是你在扩增的引物上设计酶切位点,然后在PCR结束后,酶切PCR产物,再克隆至同样酶切处理后的载体中。三是Infusion克隆。这个较复杂,你可以参见clontech网站上的说明,货号是639648.
再问: 如果我获得全长CDNA了,如何克隆目的基因啊?????辛苦指教
再答: 那你就需要将这全长用PCR的方法扩增出来,然后采用某种克隆手段将它克隆至某一载体中。 具体有这么三种,一是TA克隆,就是用Taq酶扩增之后直接连到T载体。二是酶切位点克隆,就是你在扩增的引物上设计酶切位点,然后在PCR结束后,酶切PCR产物,再克隆至同样酶切处理后的载体中。三是Infusion克隆。这个较复杂,你可以参见clontech网站上的说明,货号是639648.