引物加酶切位点以后还要分析吗?

来源：学生作业帮编辑：搜搜做题作业网作业帮分类：综合作业时间：2024/07/28 14:12:25

引物加酶切位点以后还要分析吗?

看样子你是要做克隆,给你说说我的经验吧,
带酶切位点的引物设计：保护碱基（4个）+酶切位点（6或8个）+与模板匹配序列（15-20个）.如果是一般的质粒做模板15个配对的绝对没问题,如果是比较复杂的模板,文库一类的,20-25个.
保证3‘端的5个碱基里有3个是G/C就行.我从来不用软件分析的.
PCR时,退火温度就是60度,25个循环.
你试试吧,肯定没问题的,我以前设计引物时也是很小心的,用软件分析半天,其实发现没有多大影响的.发卡结构,3’封闭,GC含量,TM值,影响也都不是这么大.
纯属经验,希望你的实验有好结果吧

有关PCR引物设计好像引物设计好以后,还要添加什么保护碱基,有时还要添加酶切位点,这些东西添加进去后,不是无法和模板链连为什么在基因克隆中,除开设计PCR引物还要设计表达基因引物? 这是引物二聚体吗? 引物分哪几种?扩基因所用的引物和做RT-PCR的引物一样吗? SPSS相关性不显著还要继续回归分析吗汉语结构分析打完架以后以后在这里是什么词?这句话是定中短语吗?还是? 请问ISSR标记的引物是通用引物吗?本人要做披碱草属方面的ISSR标记,发我一些引物信息. 14岁以后还要接种流脑a+c和乙脑吗? 以后有了工作经验了,四级证书还有用吗?找工作还要看四级证吗? pcr技术中的引物需要复制吗? PCR扩增不出就引物有问题吗? PCR技术中引物脱落吗?