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pet28a作载体的重组质粒转入大肠杆菌怎么检测筛选,酶切位点是NdeI和XhoI,可以用氨苄青霉素或蓝白斑筛选?

来源:学生作业帮 编辑:搜搜做题作业网作业帮 分类:综合作业 时间:2024/07/05 01:33:01
pet28a作载体的重组质粒转入大肠杆菌怎么检测筛选,酶切位点是NdeI和XhoI,可以用氨苄青霉素或蓝白斑筛选?
貌似没有抗氨苄青霉素基因啊
pet28a作载体的重组质粒转入大肠杆菌怎么检测筛选,酶切位点是NdeI和XhoI,可以用氨苄青霉素或蓝白斑筛选?
我晕,AMP是可以插入的,方法有很多,比如酶切,比如overlapping PCR,不过还是建议用卡那霉素筛选,蓝白斑也可以的.有lacI可以弄蓝白斑的.不过筛选出来的单克隆还是要酶切鉴定的哦~或者去送测个序列~保证是你要的而不是空载体
再问: 呵呵,第一次做实验啊,是要先用卡那霉素筛选出转进质粒的细胞,然后用蓝白斑吗,网上说用蓝白斑又要Lac Z 神马的~lacl 也行吗\(≧▽≦)/
再答: 貌似是要lacZ我弱爆了。。。那个用卡纳就行了啦。。。你涂卡纳板筛单克隆,然后酶切鉴定之后测序,得到需要的质粒不就得了~最简单了啊~