如何将淀粉酶基因通过基因重组技术转移到酒精酵母细胞中
来源:学生作业帮 编辑:搜搜做题作业网作业帮 分类:生物作业 时间:2024/08/09 02:55:57
如何将淀粉酶基因通过基因重组技术转移到酒精酵母细胞中
...你问了个研究生3年才能做完的问题
简要解答下:
1、获得淀粉酶基因——根据你的淀粉酶在NCBI搜索一下序列,根据序列设计PCR引物.
2、合成引物,PCR获取目的片段(别说你手上没有能P出淀粉酶基因的菌或者DNA,如果没有,去买,或者自己筛选——自己筛选又够一个研究生毕业的)
3、选择一个大肠杆菌-酒精酵母穿梭载体(就是能在这两种菌里稳定扩增,还能在酒精酵母里表达外源蛋白的载体,这个载体要有酒精酵母启动子)
4、把你PCR获得的淀粉酶基因片段酶切、连接到载体上.
5、转化
6、铺板,筛选
7、培养
完了
简要解答下:
1、获得淀粉酶基因——根据你的淀粉酶在NCBI搜索一下序列,根据序列设计PCR引物.
2、合成引物,PCR获取目的片段(别说你手上没有能P出淀粉酶基因的菌或者DNA,如果没有,去买,或者自己筛选——自己筛选又够一个研究生毕业的)
3、选择一个大肠杆菌-酒精酵母穿梭载体(就是能在这两种菌里稳定扩增,还能在酒精酵母里表达外源蛋白的载体,这个载体要有酒精酵母启动子)
4、把你PCR获得的淀粉酶基因片段酶切、连接到载体上.
5、转化
6、铺板,筛选
7、培养
完了
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