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我的引物设计有30个碱基,tm值分别为88和84,是不是太高了?那退火温度怎么设定啊?

来源：学生作业帮 编辑：搜搜做题作业网作业帮 分类：综合作业 时间：2024/07/28 18:06:24
我的引物设计有30个碱基,tm值分别为88和84,是不是太高了?那退火温度怎么设定啊?
我的引物设计有30个碱基,tm值分别为88和84,是不是太高了?那退火温度怎么设定啊?
退火温度一般是TM值减10度,不过实践证明低些也能扩出来,我就扩过TM在80左右的,退火温度没超过60度就扩出来了.另外,不知你用什么软件分析的TM值,不同的软件好像算法不太一样.
为什么做PCR设定引物退火温度时设定的退火温度要比合成引物得到的引物Tm值低几度? TAILPCR 反应体系中退火温度一般是多少 和特异引物的TM值有什么关系吗 带酶切位点的引物设计时计算Tm值,退火温度及GC含量时是否要把酶切位点和保护碱基计算在内?我觉得不用,因为酶切位点可以不 PCR过程中引物的碱基数量与种类 和 退火温度有什么关系? 退火温度与引物的TM值有什么联系?为什么退火温度要比TM低5度左右最合适? 设计的引物19个碱基,其中包括6 bp的酶切位点和3个保护碱基,和模板配对的只有11个碱基,是不是太短? 为什么pcr 引物设计出来,下游引物加上酶切位点和保护碱基后,有一个Tm值是负值呀? 设计引物的时候上下游引物的退火温度分别是56.9和56摄氏度,PCR时退火温度应选多少度! 设计pcr体系质粒扩增扩增片段1.8kb两引物都是87碱基pfu酶怎样设计预变性 变性 退火 延伸的时间和温度我的引物g PCR扩增目标基因,完全没有条带.是不是设计的引物太短?引物只有10个碱基和模板配对 tm值与退火温度[求助]我想进行引物的特异性检验,进入primer-blast,怎么设置一些相关参数?我想进行引物的特异 在做RT-PCR时,或者是一般的PCR时,退火温度怎么设置,退火温度和Tm值之间有怎么样的关系?