TA克隆全是阴性我把1400bp的片段连接到宝生物的PMD18-T载体上,转化后,全是白斑,但是挑了二十个全是空载体,
来源:学生作业帮 编辑:搜搜做题作业网作业帮 分类:综合作业 时间:2024/08/06 14:50:47
TA克隆全是阴性
我把1400bp的片段连接到宝生物的PMD18-T载体上,转化后,全是白斑,但是挑了二十个全是空载体,
我把1400bp的片段连接到宝生物的PMD18-T载体上,转化后,全是白斑,但是挑了二十个全是空载体,
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首先 先确定你用的聚合酶是否能在末端加个A(一般都有)
其次 确定PCR产物是否按要求纯化,连接操作是否按说明来
然后 确定你正确的制备了感受态的大肠
再次 确定使用了抗性培养基,确定使用了iptg诱导
最后 虽然宝生物的载体比较好用,但是还是有转化率的问题...不过20全空.肯定是你的问题了
其次 确定PCR产物是否按要求纯化,连接操作是否按说明来
然后 确定你正确的制备了感受态的大肠
再次 确定使用了抗性培养基,确定使用了iptg诱导
最后 虽然宝生物的载体比较好用,但是还是有转化率的问题...不过20全空.肯定是你的问题了
双酶切老是切不完全我PCR克隆了一段200bp的基因片段,然后连接到了T载体,引物2端各有EcoRI和HindIII的酶
TAKARA的PMD18-T载体可以用哪个通用引物验证?用了TAKARA的PMD18-T载体转入了目的片段,想用PCR验
目的基因未连接到克隆载体上这是为什么?我用的克隆载体是PMD-18!
关于 克隆的问题.假如我有有一个基因片段,未知序列.我可以把它连接到T载体,然后PCR
菌液PCR不同条带将已扩增出来的993bp的cDNA与T载体连接,之后DH5α转化,涂平板,挑克隆!菌液PCR为何一组检
TA克隆时,如何选择T载体?
如果将PCR扩增的X基因片段与克隆载体连接,并转化入宿主大肠杆菌中,写出技术路线(包括基因和载体的连接、转化和鉴定)和关
为什么我的目的基因连接克隆载体转化、提质粒后,酶切鉴定正确,而质粒PCR和菌液PCR鉴定都不正确呢?着急
如果我把目的基因连接到质粒载体上,这个载体质粒又有多个启动子,我怎么知道它用那个启动的呢
含有目的基因的克隆载体打入生物体内,是如何表达蛋白的呢?
提取的质粒跑电泳出来带很杂,目的片段1700bp,用的是pMD19—T载体,从左往右第三泳道和第九泳道是空质粒
连接到T载体上面后,做双酶切,条带不正确,目的片段变大是什么原因