重组质粒转化假阳性

不是滴~~~~再问：为什么再答：将目的基因与质粒结合为重组质粒是在细胞外进行的，不论的这个重组质粒的作用是什么。再问：那与某种病毒结合为重组DNA是在细胞内进行么，为什么再答：那要看你的这个病毒是否是

重组质粒是游离在宿主细胞中单独复制的,不会整合到宿主基因组中.

再说一遍,PUC18携带氨苄青霉素抗性基因只能筛选转化子,没法筛选重组质粒!详细的说,就是氨苄霉素抗性只能筛选转入了质粒的菌,而这个质粒是否是重组的质粒是没办法筛选的!只能用其他方法,比如蓝白斑法才能

分子水平上,用人工的方法提取（或者合成）不同的生物的遗传物质,在体外切割拼接和重新组合,然后通过不同方法把重组的DNA分子引入受体细胞,使外源DNA在受体细胞进行复制与表达,按人的需要生产不同的产物或

1、“切开的质粒”等于“线性DNA”.2、“线性DNA转化细菌、以及真菌的原生质体”已经成功.所以,切开的质粒能转化进入感受态细菌.但是,不能复制.如果质粒上带有与细菌染色体上同源序列,质粒可以重组交

对呀如果将细胞涂在汗抗生素的板子上（或者培养基中）,不含抗性基因的细胞就会被杀死,如果细胞成功的转染了质粒,得到了那个抗性基因,那么就不会被杀死,这个是最常用的筛选方法

G418通过干扰核糖体的功能而阻断细胞的蛋白合成,阳性克隆中因含有抗性基因可以存活.由于基因转染到细胞内之后要一段时间才能表达出蛋白质,所以筛选不能太早一般要在转染24小时之后才开始加G418筛选.随

培养之后,根据质粒上的筛选标记,才能知道是否发生了转化.或者是为了让质粒在细菌中大量复制.

可以.载体是可以插入核酸片段、能携带外源核酸进入宿主细胞,并在其中进行独立和稳定的自我复制的核酸分子.基因工程中广泛应用的载体多来自人工改造的细菌质粒、噬菌体或病毒核酸等.多数载体是DNA分子,质粒就

如果是重组质粒的话,应该两种,正义基因表达载体和反义基因表达载体.再问：���������廹���������������ͷ��������������

你的构建策略很好,不需要用T载体.再问：为什么有的文章里面用到pMD18T这个载体呢？它是什么作用，我不太明白再答：　　pMD18T是个T载体。如果PCR产物直接双酶切效果不好，可以先把PCR产物放到

首先看你是否使用蓝白斑筛选,如果使用了白色菌落就行了,但是x-gal比较贵,所以很多实验室都不用,而用菌落PCR.首先配制clonebuffer,每400微升含EXtaqbuffer40微升,Mgcl

你的质粒提出来以后没有经过线性化,因此存在三种形态,超螺旋,单链开环和线性分子,其中只有线性分子可以用maker判断分子量大小,另外两种不行,如果你的质粒提的质量好的话,应该是超螺旋占优势,超螺旋会比

用一种限制性内切酶切割质粒和目的基因,加入DNA连接酶,形成重组DNA分子

重组质粒作为一个单独的质粒进入大肠杆菌发挥作用,不需要与ecoli体内原有的质粒结合……

重组时选择你的目的基因上没有,而质粒的多克隆位点上有的酶切位点,一般重组质粒需要两个酶,所以你要选择两个酶切位点,注意尽量避免使用切出平末端的酶.重组引物设计时首先你要确定你选择的两个酶在的酶切位点在

如果是双酶切,而且两个酶切位点不能形成自连,那么插入目的基因也只能获得一种重组质粒.如果是单酶切,或者双酶切的两个酶切位点是同尾酶,那么插入目的基因能获得两种重组质粒.

基因表达载体的构建（即目的基因与运载体结合）是实施基因工程的第二步,也是基因工程的核心.　　将目的基因与运载体结合的过程,实际上是不同来源的DNA重新组合的过程.如果以质粒作为运载体,　　首先要用一定

是目的基因这样才能说明你转化进去的是连了目的基因的质粒而不是自连的质粒.转化后挑菌摇菌后提了质粒才能测序,浓度才够再问：谢谢，在下是新手。再问一下：是连了目的基因的质粒还是单纯的目的基因呢？提质粒测序

什么基因?什么质粒?正常情况不用这样做的一般做表达用的基因片段是需要测序鉴定的连T载体就是为了去测序,证实你扩增片段没有突变且是你需要的目的片段然后再去连接你的目的载体就ok了