pcr反应体系中能不能加入两对反应引物

标准的PCR反应体系：10×扩增缓冲液10ul4种dNTP混合物各200umol/L引物各10～100pmol模板DNA0.2ugTaqDNA聚合酶2.5uMg2+1.5mmol/L加双或三蒸水至10

PCR-RFLP是聚合酶链式反应连接的限制性片段长度多态性分析的简称.是在PCR和DNA序列分析基础上产生的RFLP技术.该方法是通过PCR扩增一段DNA片段,然后再选择适当的限制性内切酶,消化PCR

在做QRT-PCR时,一定要有内参,即在PCR时,每个标本都要做对应的内参,而且每次都是看家基因,一般用bate-actin,有时也用GAPDH.内参的选择：普通PCR内参的大小没有多大要求,但rea

模板1-100ng引物1（10uM）0.1-0.5uM引物2（10uM）0.1-0.5uMdNTP(10mM)1mM聚合酶5-10U聚合酶缓冲液(10*)10倍稀释水补足所需体积

是的,你需要用等量体系分别用每对引物进行PCR.实际操作时,我们要求至少3份biologicreplica,用来检测你所测到的表达变化确实是因为实验组与对照组之间的差别.同时这3份biologicre

楼上说的挺有道理,一般pcr反应体系的大小根据扩增的目的来确定,如果扩增后的产物还要用于后续的实验的话就要加大反应体系,50ul或者小体系25多做几管；如果仅仅是为了检测目的条带的话就可以做小体系的如

随机引物PCR如果是RAPD的话,是要用单引物的一般是10bp大小的,CG含量要高于60%.

根据各试剂的终浓度来确定自己添加量,至于究竟应该用多大的体系我认为要根据自己的情况来确定,常用的有20,25,50等体系.建议参考别人的文献,一般做基因克隆的文章都会写反应体系,每种试剂用量.

1、C+H2O=CO+H2吸热反应CO2有两个作用：2、C+CO2=2CO也是吸热反应,吸热最多3、CO2+H2=CO+H2O也是吸热反应,不过吸热最少反应2是一个与反应1竞争C的反应,反应速率减慢是

模板,引物,聚合酶,原料加温度循环的条件

反应体系中加入催化剂,反应速率增大,E1和E2均变小因为加催化剂是降低反应所需活化能（也就是E1）使反应可以在较低条件下进行.所以E1就减小了所以E2也减小了但E2-E1的值不变也就是反应前后总能量变

加入DMSO利于减少DNA的二级结构,使G、C含量高的模板易于完全变性,在反应体系中加入DMSO使PCR产物直接测序更易进行.

我帮你BS一楼.问反应体系,他给黏贴PCR的概念.PCR反应体系,简单的说,就是PCR管子里所有东西的混合溶液,就是溶解有引物、模板DNA、游离碱基、Taq酶、甘油等等的水溶液.

首先要看你的条带是否清晰,虽然亮度不够但是清晰度应该高,没有拖尾没有非特异条带和引物二聚体,如果以上都没有,仅仅是目标条带不够亮的话,我觉得你可以将25微升体积同比放大至50微升反应体系,相应的制胶的

PCR体系就是指一定比例的PCR要素（水、引物、酶、镁、dNTP、模板）的混合物.常用的体系有10微升、20微升、25微升、50微升等.通常小体系用于检测、分析,而大体系用于回收PCR产物.但是要注意

这个比较简单,其实你买Taq中就有反应体系,其实这个体系都是公司的人大量实验做出来的,我们实验室现在用Takra的Taq酶,体系就按说明书加的,不过体系是50ul的,我们把所有都减半做了25ul体系就

从两条引物Tm看,退火温度大致在52~57℃左右.在这个范围内做下温度梯度.标准PCR体系就可以.ps：引物有些偏长.

典型程序：94℃,5min;(94℃,30s；55℃,30s；72℃,1min)x30；72℃,5min.典型体系：10Xbuffer（含Mg2+）,5ul；2.5mMdNTP,2ul；10uMpri

如果你的实验室对pcr反应体系已摸索很清楚,就不用换反应体系,没有扩出dna可能跟你的操作有关,你可以做个阳性对照,就可以知道是否是体系的问题,一般实验条件体系摸索的很清楚的实验室,体系一般不会有问题

20uM引物浓度指得是引物workingsolution的浓度.也就是说,当你从装有引物的管内,吸取一定量,加入到PCRmastermix配成反应混合液的时候,这个引物管内的浓度是20uM.如果1ul