蛋白定量后内参不齐

直接在NCBI里面查找金银花的内参基因,如果没有的话,就找与金银花同种属植物的内参基因.我做过猪的,在NCBI里查不到猪的内参基因,我就用的小鼠的,因为是持家基因,所以在哺乳动物里面表达的差异不大,也

可以.定量PCR内参的选择最重要的是这个基因在不同个体之间的此组织（比如是肌肉）表达恒定.所以你需要找好了.

这要看你内参照的意思是什么了,如果是防止假阴结果,比如PCR体系受抑制之类的,如果有内参就知道这个结果是被抑制了还是真阴性结果,这时内参探针设计非常简单,就是将目标探针中间几个点突变一下,内参引物和靶

就是你那样做的.亮的就稀释模板,上样量当然要保持

内参就是一个表达量在各个组基本保持不变的基因,又叫看家基因,比如常用的GAPDH,actin.或者18srRNA也可以.如果内参表达量一致,说明你PCR的上样量一致,样本的质量也一致.如果出入很大,说

啥都没有的话是无法设计的首先你可以克隆获得内参的序列,再进行下一步实验再问：如果是想用18srRNA这个内参，我该怎么设计引物来得到这段序列呢？再答：这个在各个物种中的同源性很高的，你可以直接用其他物

点个预染marker就看到了

出现“四、标题4”这种情况,将光标定位在“标”字前,鼠标移动到水平滚动条的“悬挂缩进”对应的“左对齐式制表符”往左拖动即可

这个就是SYBRGREEN的局限了.你要做内参话,必须在不同的管子里面另外在同时做.就像楼下说的那样.这样的话,不同管子见的加样误差就会干扰实验数据.内参的目的就是来对照加样误差的.实际上,真正的内参

这是由你设计的引物决定,一般控制在200bp以下为佳.包括你要检测的目的基因,设计的片段长度也控制在200bp以内.保证扩增效率较为一致.

那是内参引物可能有问题,建议重新设计内参引物

很简单,早上起床后尿尿,弃掉,开始留尿,每次尿都留在一起,24小时后把所有的尿混匀,量出尿量,留大概20——50毫升足已.如果医院给防腐剂从开始留尿时候加入防腐剂,如果医院没有给就不用加,无所谓.

因为内参和目标基因的扩增效率有可能不一样,所以CT值不能直接相减.只能是内参间先算出相对量,目的基因也算出相对量（倍数）,然后在用目的基因的倍数除以内参的倍数.再问：一共有三个内参基因，他们的几何平均

当目的蛋白的分子量大小与选用的内参蛋白分子量大小相差比较明显情况下,可以在转膜后预染,根据蛋白质Marker的大小将膜剪为大分子量和小分子量两部分,使内参蛋白与目的蛋白分开.然后两块膜分别与内参蛋白抗

当然是ELISA好了,ELISA在科研上主要用于定量,而Westernblot主要用于定性,当然,根据灰度可以半定量,但这个准确性就差很多了,还有免疫组化,这个是用于定位的.免疫学三大工具,免疫组化、

要检测一个基因的表达产物是否正确,或者比较表达产物量的相对变化,首选方法是WesternBlot.因为WesternBlot操作相对简单方便,既可以定性分析表达产物,同时还可以指示目的蛋白量的相对变化

24小时尿蛋白定量中的“24小时的尿量”,就是把早上的第一次的小便排干净后,从第二次的小便开始留.看一下这时是几点,记一下时间,直至第二天的这个时间,为24个小时.把这24个小时内的,每一次的所有的小

30是指内参上样量是30微克的情况下,具体上多少就是多少.灰度值差异很大,所以不能直接用来分析.要分析就是用比值分析.用比值来分析比较下实验组和对照组就可以避免出现绝对灰度值.

首先,什么是24小时尿蛋白定量?　　医生回答24小时尿蛋白定量的问题：　　在正常情况下,肾小球只能通过分子量较小的物质.健康儿童每天尿中排出的蛋白质少于40毫克,这一含量用蛋白质定性试验的方法一般不能

不需要特殊的保存,放在一个集中在一个容器内就好