extaq与rtaq退火温度一样吗
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/08/17 23:18:29
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58C,如果是有模板的话,58C或再低一些都可以,其实退火温度不需要刻意去要求,一般的PCR,52-60C就可以全解决.
实际pcr的退火温度一般都是从55℃开始的,有杂带退火温度就提高一点,目的带比较微弱退火温度就降低一点,不用管那个引物单子上的温度,那样太麻烦,有的实验室一天做几百个样品的pcr,如果个个要看引物单子
退火温度是影响PCR反应特异性的重要因素.引物与模板复性所需要的退火温度取决于引物的长度、碱基组成及其浓度.引物长度越短,引物中G+C的含量越低,所需的退火温度越低.虽然降低退火温度可能增加扩增产量,
退火温度与引物的TM值的关系主要和DNA聚合酶与其buffer有关.有些退火温度要比TM低5度、3度,有些还会高3度,有些是一模一样的.主要参考不同公司所生产的DNA聚合酶的说明书.
经冷塑性变形后的金属加热到再结晶温度以上,保持适当时间,使形变晶粒重新结晶为均匀的等轴晶粒,以消除变形强化和残余应力的退火,称为再结晶退火.再结晶退火的温度一般比该金属的再结晶温度高100-200°C
计算退火温度的方法:1.退火温度=4×(G+C)+2×(A+T)-(5~8)只是粗算,有时不灵,但比较简便.2.用primer5(oroligo6)计算,引物配对好后,primer5可以显示Tm,我认
分别摸索实验条件测定,根据DNA电泳判断不过其实在做PCR的时候,根据合成的引物中的GC含量可以用公式计算出退火温度,一般比GC计算出的公式低5度比较合适
热处理不可强化合金通常达到O态后在一定温度区间内其抗拉强度和延伸率是缓慢下降的.查看原帖
你做个退火温度的梯度吧!大部分的PCR都有这一功能!退火温度选择一个范围,如50-60度,PCR仪器在一排(12个孔)或一列(8个孔)中每个孔的温度都不同,你在相应的孔中放入待反应的PCR混合液(保证
通常来说,退火温度是由引物的GC%含量决定的,但是反应体系的条件改变也会影响引物的退火温度(如Mg,Na等离子浓度).建议你去http://www.idtdna.com/analyzer/Applic
唉,这种题就是中国特色,完全理论脱离实际.\x0dPCR退火温度是一个范围,一般是50度到65度,或者到70度做两步法PCR.其中,模板的GC含量、模板的组成(单一模板还是cDNA还是全基因组DNA还
可尝试45-70度设个梯度退火,P一次就知道哪个温度最适合.如没有梯度退火的PCR仪,则可试试两个Tm值中间的温度,一般较多在50、55度可P出来.你试试吧.
TM值是在一定buffer盐浓度情况下计算出来的.你需要查一下你的PCR体系里buffer盐的浓度,然后找相应的TM值.不过TM值也是一个估算值,举个例子,以你的正向引物而说,TTACAAGATGGA
软件终归是软件,一个PCR体系的具体反应条件不通过实际运行是无法得知最佳退火温度的.建议你做一个梯度PCR摸索一下最佳退火温度.
球化退火是使钢中碳化物球化而进行的退火工艺.将钢加热到Ac1以上20~30℃,保温一段时间,然后缓慢冷却,得到在铁素体基体上均匀分布的球状或颗粒状碳化物的组织.球化退火主要适用于共析钢和过共析钢,如碳
一般用55°,不行的话用58°,再不行的话就设置从58-55的touchdown
引物的另一个重要参数是熔解温度(Tm).这是当50%的引物和互补序列表现为双链DNA分子时的温度.Tm对于设定PCR退火温度是必需的.在理想状态下,退火温度足够低,以保证引物同目的序列有效退火,同时还
说影响得看情况,退火温度太高肯定会影响引物的结合效率的.但是,实际上,好的引物一般是上下游引物的退火温度比较接近.有时候,我们可能会通过牺牲特异性的手段(当GC含量过高时,减少引物长度)来平衡两条引物
计算退火温度的方法:1.退火温度=4×(G+C)+2×(A+T)-(5~8)只是粗算,有时不灵,但比较简便.2.用primer5(oroligo6)计算,引物配对好后,primer5可以显示Tm,我认
390C--420C,保温1-2小时,