ctab提取dna的实验原理
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/07/23 07:20:04
多放一点液氮,磨得时间适当长一些.如果你的样品比较多,在液氮还没有蒸发前迅速把粉末转移到EP官管中,然后把它暂时放到-20的冰箱中,等所有的样品全部磨好后统一加CTAB.你做实验的时候材料最好尽量新鲜
CTAB法原理CTAB(hexadecyltrimethylammoniumbromide,十六烷基三甲基溴化铵),是一种阳离子去污剂,具有从低离子强度溶液中沉淀核酸与酸性多聚糖的特性.在高离子强度的
1)取材料,加液氮研磨成粉末状,迅速移入1.5mlEppendorf管中;(2)加入800μl的CTAB提取缓冲液,混匀(CTAB在65℃水浴预热),每5min轻轻震荡几次,20min后12000r/
(1)取材料,加液氮研磨成粉末状,迅速移入1.5mlEppendorf管中;(2)加入800μl的CTAB提取缓冲液,混匀(CTAB在65℃水浴预热),每5min轻轻震荡几次,20min后12000r
前面的步骤没有操作好,要么是你的样品比较特殊,含有较多的色素或脂肪,先用电泳检测一下,如果条带清楚就可以用,如果混乱要修改实验设计.不知道你提的是动物还是植物的DNA,估计可能是植物色素或者是叶片的蜡
液氮只是为了便于破碎植物组织,没有也一样能提取DNA,毕竟加CTAB后还要65度水浴,分解得厉害的话就减少振荡,或增大CTAB用量,使DNA尽可能多地浸取出来.再问:那研磨的时候为了是它充分的研磨是要
你在沉时加入1/2V的5MNacl和2V的无水乙醇,主要是高浓度盐离子可以使多糖悬浮在溶液中,无水乙醇可以减少杂质离子的沉淀,试试吧,我一直这么做,效果还可以吧再问:哦,非常感谢!我一直都是用1/10
CTAB法原理CTAB(hexadecyltrimethylammoniumbromide,十六烷基三甲基溴化铵),是一种阳离子去污剂,具有从低离子强度溶液中沉淀核酸与酸性多聚糖的特性.在高离子强度的
DNA不溶于95%的酒精溶液,但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精溶液.利用这一原理,可以进一步提取出含杂质较少的DNA.这里,用酒精可以洗脱在前几步实验中使DNA携带的盐离子
(1)可以的,液氮冷冻更容易破碎细胞壁释放DNA,但是不冷冻也没关系的,提取的DNA量即使少点也足够满足试验要求.(2)-20度足够保存,用一年以上都没问题,超低温保存时间当然更长,但是切忌反复冻融,
呃……能说下具体的改动部分吗?一般来说,改良法是应用于多年生植物组织的DNA提取,含有较多的酚,多糖,硅质等,棉花和水稻的DNA提取也需要一定的修改.思路有两个,一方面尽量去除杂质、蛋白和脂类,另一方
1,研磨要充分2,纯化的时候小心点不要吸取杂质以提高纯度详细的可看我们团队的贴吧,里面有专门的贴子,也可以来讨论
Tris饱和酚分上相(tris)和下相即有机相酚,这样保存可以避免酚的挥发以及防止酚类氧化成醌,抽提时取下层酚相.在吸取的时候要将枪头插到水相以下的酚相.若吸到的是上层tris溶液,它会与我们的上清互
下游做PCR的话,应该保证模板的纯度,CTAB法提取多半会得到浓度不错但纯度不够的DNA,建议将得到的DNA进行纯化,或者直接使用试剂盒提取,现在的国产试剂盒都还不错的,节约时间又不贵
1)取材料,加液氮研磨成粉末状,迅速移入1.5mlEppendorf管中;(2)加入800μl的CTAB提取缓冲液,混匀(CTAB在65℃水浴预热),每5min轻轻震荡几次,20min后12000r/
加入LiCl这一步.氯化锂可以选择性沉淀RNA.
因为琼脂糖凝胶只能分辨20kb以下的线性DNA,超过20kb的线性DNA都只会和20kb的线性DNA拥有一样的迁移速率.而基因组DNA一般都远远大于这个数,所以一般情况下所有的DNA都只会聚集于一条带
看你的DNA用来干嘛了,如果要求不高可以不加再问:做普通PCR,我知道能提出DNA几乎就可以了,只是我想弄明白加BI这一步的作用,有劳赐教,谢谢。再答:你的bi全称是什么?
是叶片嘛~总会有许多色素的~每次提的状况也不一样~还有老叶子的话色素蛋白会更多~用嫩的吧~
我用过CTAB法提取植物叶片DNA,会得到叶片中所有的DNA,总DNA里当然包括叶绿体和线粒体DNA,使用这种模板可以进行叶绿体和线粒体基因组上的扩增,我以前做过TRNL_F这个基因的扩增,用的就是C