插入抗生素基因质粒的目的
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/07/16 08:24:36
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首先回答你后面那个问题:质粒在细胞内的复制是受到一定控制的,按其所受控制的程度可分为两类:严紧型和松弛型.严紧型质粒的复制受到严格的控制,每个细胞中的数量只有1~2个,它们似乎与染色体的复制受相同因素
标记基因是一种已知功能或已知序列的基因,能够起着特异性标记的作用.在基因工程意义上来说,它是重组DNA载体的重要标记,通常用来检验转化成功与否;在基因
没有严格的界限的,从100bp--5000bp都可以使用一般的载体的.太长的使用一般载体的话就不太好连了.按现在研究的微生物目的基因很少有超过5000的.植物基因一般比较长,一般都是构建自己的启动子和
首先我说一下,质粒上并不是“抗生素基因”,而是“抗抗生素基因”,此种基因编码一些专一性的酶催化抗生素分解,比如抗青霉素的酶就是“贝塔内酰胺酶”,催化青霉素的内酰胺环开环.所以只要菌体内有这种带上了抗抗
具有相同的粘性末端的两条DNA链在连接酶的作用下相连.只有一种酶切时,切出的粘性末端相同,让目的基因和质粒相连接即可,但是由于是混合,连接的结果不尽相同.DNA连接酶将目的基因和质粒粘性末端的3-5磷
正如你所言,如果没有插入目的基因,只是载体导入同样能抗青霉素.问题的关键在于我们做实验时是吧质粒和目的基因动用限制酶剪切了,再用连接酶连接,其结果是有载体自连接的(只有载体)有重组的;有目的基因自连的
它们所切出的末端一样,这样根据碱基配对才能黏合,而他们中间的基因是不一样的,只是切口处相同.
筛选用的.因为基因重组到质粒后需要导入受体细胞进行表达.质粒中有一些是重组的有一些是没有切开或者重组不成功的重新变回原来的质粒.那么筛选的时候如果细菌长出来其中一个抗性另一个不抗性那么可以说明中间被插
我看是要用氨苄霉素进行筛选.楼主说的两点都对,所以因为第2点所说的原因,用四环素肯定会杀死你想要的细胞滴.至于第一点所担心的纯度问题,当然也是可能有某些细胞带有空质粒啦.这只能够靠前期插入(ligat
你的质粒提出来以后没有经过线性化,因此存在三种形态,超螺旋,单链开环和线性分子,其中只有线性分子可以用maker判断分子量大小,另外两种不行,如果你的质粒提的质量好的话,应该是超螺旋占优势,超螺旋会比
目的基因是与质粒结合成为重组DNA的限制性核酸内切酶则是用来切断质粒与所需要的DNA(即有目的基因的DNA)的磷酸二脂键让其产生相同粘性末端然后再让DNA连接酶将质粒与目的基因组合打个比方说限制性核酸
因为重组质粒上有抗生素抗性基因,然后如果导入成功的话,那么含有目的基因的细胞中也就有了抗生素抗性基因.比如说这个抗性基因是抗四环素基因,那么就把细胞放在含有四环素的培养基中培养.能够在其中存活的,就是
原理是这样的: 质粒上有四环素抗性基因和氨苄青霉素抗性基因,如果将这样的质粒导入受体细胞中,则受体细胞既能在有四环素的培养基上生长,也能在含有氨苄青霉素的培养基上生长; 将目的基因插入到四环素抗性
质粒是细菌细胞内一种自我复制的环状双链DNA分子,能稳定地独立存在于染色体外,并传递到子代,一般不整合到宿主染色体上.现在常用的质粒大多数是经过改造或人工构建的,常含抗生素抗性基因,是重组DNA技术中
重组体
每个基因都有自己独立的启动子和终止子,所以不影响另一个基因的表达,只有因插入目的基因而被破坏的那个抗性基因不能表达
不一定,可以是同种细菌的质粒.再问:只要有不同于宿主细胞质粒的标记基因用于鉴别就行了吗?再答:是的再问:也就是说不可以用宿主细胞里的质粒插入目的基因对吗?再答:对的,因为你们现在学习的内容不会出现:在
southern是检测你的目的基因是否转入受体即你的转基因植物中,在插入了目的基因的表达载体中应该可以检出你的目的基因,但这并不意味着你的目的基因就一定会成功的转入植物中.不知你转的是什么植物,如果你
这个问题我来回答你:重组质粒上的抗生素基因一定是受体细胞所没有的.比如:重组质粒上有抗青霉素基因为标记基因,导入的大肠杆菌中原本是不带有抗青霉素基因的.这样把所有的大肠杆菌接种到带有青霉素的培养基上,
跑胶看大小啊,如果是转到了细菌中,就用目的基因的引物做PCR,能P出来的就是