扩增CDS TAA

是实时定量吗?相对定量deltadeltaCt法的话,即比较内参与目的基因扩增效率是否相同,用Ct值为纵轴,模板cDNA稀释倍数为横轴做拟合曲线,比较目的与内参这两条拟合曲线之间R平方值是否符合要求（

因为DNA聚合时需要3‘OH,这个只能由引物提供（没原因,就因为是那样）.这个引物是一小段RNA,引物绝对是RNA,而不是DNA.看看DNA复制需要什么酶就知道了,需要依赖DNA的RNA聚合酶（DDR

只要有目的基因的片段存在,无论是质粒还是基因组还是其他类型的DNA片段,都是可以的.

用primerblast,输进去上下游,选好种属和扩增对象search不就出来了

若是根据已知序列扩增未知物种的相应序列,可以根据先根据已知序列进行Blast搜索,发现其他同源序列,保存后进行比对,找出其中较保守区域,并根据Primer或Oligo等软件对某条序列进行分析,搜索其中

基本不是.当今发展出各色各样的PCR扩增技术,各色各样的高温聚合酶,就是来解决PCR扩增中遇到的扩不出、扩增效率低的问题.如巢式PCR就是扩增那些拷贝数很低的基因片段.有些重复片段的扩增,GC含量高的

有了大量特定的引物和模板链就可以大量的复制的DNA

我个人感觉对PCR影响最大的是模板质量和退火温度,至于其他的影响因素那就太多了,模板纯度浓度,引物质量,体系中的物质（buffer,酶,Mg2+,dntp浓度）,退火和延伸温度.一般来讲,引物从ref

以PCR产物为模板,只要引物,体系对,怎么P怎么出.你的模板就是PCR产物,浓度再低也没事,稀释100倍没问题.没什么要注意的

解题思路：PCR技术解题过程：varSWOC={};SWOC.tip=false;try{SWOCX2.OpenFile("http://dayi.prcedu.com/include/readq.p

这个你应该看仪器说明书啊,而且一般送货上门后有人会指导的啊.

能说下原题么、

引物长度和专一性常见的引物长度为18-30个碱基.短的引物（≤15碱基）能非常高效地结合,但是它们的专一性不够.较长的引物能提高专一性,然而退火效率低,从而导致PCR产量低下.同时应避免编码单一序列和

1.有没有你的程序尤其是温度.2.引物没问题?3.样品DNA没问题?4.染色没问题?（最好是电用完以后染色比较安全,15-20min最佳）

非特异性条带的出现,其原因：一是引物与靶序列不完全互补、或引物聚合形成二聚体.二是Mg2+离子浓度过高、退火温度过低,及PCR循环次数过多有关.其次是酶的质和量,往往一些来源的酶易出现非特异条带而另一

PCR非特异性扩增指的是你进行PCR所扩增出来的条带不是所要的,引物与模板在非目的条带处有错配,导致延伸产物不是目的条带.非特异性扩增在琼脂糖电泳时可以看到在目的条带外出现了其他条带.引起非特异性扩增

PCR(聚合酶链式反应）是利用DNA在体外摄氏95度时解旋,55度时引物与单链按碱基互补配对的原则结合,再调温度至72度左右DNA聚合酶沿着磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互补链.由PCR技术制造

计算退火温度的方法：1.退火温度＝4×（G＋C）＋2×（A＋T）－（5～8）只是粗算,有时不灵,但比较简便.2.用primer5（oroligo6）计算,引物配对好后,primer5可以显示Tm,我认

Pfu是DNA扩增过程中,保真性最高,出错率最低的高温DNA聚合酶.基因片段用Pfu扩增得到的产物为平末端,直接克隆比较困难.DNAPCR扩增：用Pfu进行高保真PCR扩增,50ul反应体积,一般扩增

可分为长产物片段和短产物片段两部分.短产物片段的长度严格地限定在两个引物链5'端之间,是需要扩增的特定片段.短产物片段和长产物片段是由于引物所结合的模板不一样而形成的,以一个原始模板为例,在第一个反应