引物稀释
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/07/12 20:22:51
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同楼上,当初我问老师这个问题时,他说大学才学这么深
正反向引物就是一个引物是从3端开始,另一个是从5端开始的.看分子生物学的书吧,里面有详细介绍DNA复制的啊,就是那些理论而已.解释的太简单了,我做过pcr扩增的实验,不懂得可以问我,我尽量回答.
不好意思,我没设计过引物,不过建议你到生物秀或是小木虫的论坛去看看,那里有很多这样的问题的
引物,是一小段单链DNA或RNA,作为DNA复制的起始点,在核酸合成反应时,作为每个多核苷酸链进行延伸的出发点而起作用的多核苷酸链,在引物的3′-OH上,核苷酸以二酯链形式进行合成,因此引物的3′-O
在聚合作用的起始时,可以刺激合成另一种大分子,并与反应物以共价键形式连接的序列.在核酸化学中,引物是一段短的单链RNA或DNA片段,可结合在核酸链上与之互补的区域,其功能是作为核苷酸聚合作用的起始点,
用PP5.0或oligo软件.网上有很多说明书的,操作十分简单再问:等于白说
关键就是这个引物的设计,如果你能设计好并且成功RT-PCR,那就没问题了.
1纳摩尔(nmol)=1000皮摩尔(pmol)9.96nmol/X=100pmol/ul解出X=99.6ul答:加入100微升vddH20PS.一般我们买回引物,管它那么多,都加100微升水用着,没
用TE(或ddH2O)稀释,按引物合成报告单上写的先稀释到100uM(一般有Todissolvedinto100uM,addXXulwater...,不过注意一下是1OD的还是一管的,一般指1OD加这
你去找各大公司的产品手册,上面会有非常详细的随机引物的序列,随机引物非常的多,有上百种
跟你模版对比就可以了!延伸方向都是5‘--3’.
最好不要有引物二聚体的产生
一般要20个碱基的长度,一对,要防止形成发夹.
随机引物PCR如果是RAPD的话,是要用单引物的一般是10bp大小的,CG含量要高于60%.
用primerpremie
是从NCBI里面的序列库中搜索的,自动搜索符合筛选条件的序列,从而给出引物序列blast是要求NCBI里面有的序列才能验证.你研究的物种基因组测序结果发布了吗?如果发布了的话就不用担心序列不全了
首先查道你的基因序列(NCBI搜),第二查引物设计原则,第三下载个引物设计软件设计,简单好用的有primerpremier5.0,这些都能在网上搜到,软件用法也能搜到.
生工的报告单上应该有一个加水量,不过那个是每OD的,你对应的加上2倍的无菌水就可以了,然后是100pm的母液,根据实验要求进行进一步的稀释.
没事,这个可以,你应该是把设计的上下游引物都进行了比对,前两个比对结果应该就是上游、和下游引物,假设你第一个结果是上游,第二个结果是下游.那么第三个结果也就是下游比对结果,下游结合的位置距离上游、下游
引物合成后干粉状态在室温下可以放半年,溶解后室温下也可以放一周,但是最好是-20度保存.你可以用灭菌水进行稀释,不过用TE进行稀释更有利于引物的保存,浓度看你自己的需要了,每个人都有自己的习惯,有的稀