96孔板mtt比色法
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/08/06 09:29:02
原理:在适当的介质中,生物碱类药物可与氢离子结合生成生物碱阳离子,一些酸性燃料如溴百里酚蓝、溴酚蓝等可解离成阴离子,而上述阳离子与阴离子定量结合成有机络合物,即离子对.可以定量的用有机溶剂提取,在一定
博凌科为活细胞中的脱氢酶能将MTT还原成不溶于水的蓝紫色产物(甲臜,Formazan),并沉淀在细胞中,而死细胞没有这种功能.二甲亚砜(DMSO)能溶解沉积在细胞中的蓝紫色结晶物,溶液颜色深浅与所含的
四唑盐(MTT)商品名为噻唑蓝操作步骤一、接种细胞1、用胰蛋白酶消化汇合的单层细胞,将细胞收集到含血清的培养基中. 2、离心细胞悬液,使细胞沉积下来.用培养基重悬细胞,计数. 3、将细胞稀释至2.
原理:活细胞中脱氢酶能将四唑盐还原成不溶于水的蓝紫色产物甲臜,并沉淀在细胞中,而死细胞没有这种功能.DMSO能溶解沉积在细胞中蓝紫色结晶物,溶液颜色深浅与所含的formazan量成正比.再用酶标仪测定
SRB是一种蛋白结合染料,与生物大分子中的碱性氨基酸结合,其颜色变化与活细胞蛋白成正比;MTT法以代谢还原MTT为基础,活细胞的线粒体中存在脱氢酶,可将黄色的MTT还原为蓝紫色Formazan,死细胞
我找到一个不一样的方法,不知是否有帮助:MTT法MTT法又称MTT比色法,是一种检测细胞存活和生长的方法.其检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒(For
博凌科为MTT比色法细胞活力检测中最重要的就是背景对照,就是不加细胞的对照.这包括两方面内容,一是指与实验孔相同,对照孔中也加入相同体积的培养基,各做3-4个复孔,取平均值,主要目的是为了减少培养基中
博凌科为(1)选择适当的细胞接种浓度.一般情况下,96孔培养板的内贴壁细胞长满时约有lo6个细胞.但由于不同细胞贴壁后面积差异很大,因此,在进行MTT比色法细胞活力检测实验前,掌握每一种细胞的贴壁率、
博凌科为贴壁细胞一般在实验前1-2日接入96孔板.太晚,细胞在传代后有一个16小时左右的停滞期,此时代谢变慢,增殖缓慢,此时的MTT数值太低;太早,实验期间,细胞生长过头,此时有死亡和凋亡的细胞,实验
需要用7块板.因为做的MTT之后,这块板就污染了,不能继续培养细胞了.
抑制率=(实验组-空白组)/(对照组-空白组)×100%,IC50有软件可以算出...想要的话留邮箱
博凌科为我觉得细胞的浓度并不需要那么精确,关键是接种于每孔的细胞数就大致处于同一水平.比如我做MTT,起初用的细胞浓度为5000/ml,每孔100ul,培养3天观察,发现细胞数太少,各孔OD值反面难于
博凌科为调整细胞浓度至1×105/ml,分别加入96孔板,每孔加200μL使每孔细胞数目是2×104个.
博凌科为(1)OD值转换为细胞数似乎不太好操作,就像楼上战友说的那样,影响因素比较多,单个细胞活性与MTT转化量是有关系的,所以需要有一个标准细胞活性的参照才能计算细胞数.(2)OD应该在0.2~1之
调节pH用测亚硝酸盐不用提取剂吧?
是生长成70%,就是细胞贴壁覆盖率达到70%.其实这并不那么严格,如果你的这个细胞长的比较快,比如说癌细胞那样,那就细胞传到培养板时密度要小一些.不然没等你做完实验细胞就长满,漂起来了.如果长的较慢那
(1)单细胞悬液接种于96孔培养板;103-104细胞/孔,每孔培养基总量200微升(96孔培养板每孔容积370微升),37℃、5%CO2培养箱中培养一段时间(根据实验目的决定培养时间)(2)加入2毫
MTT法又称MTT比色法,是一种检测细胞存活和生长的方法.其检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒(Formazan)并沉积在细胞中,而死细胞无此功能.二
灵敏度高即检出限低,这是相对于滴定分析而言的比如你要测定的物质浓度在ppm级时,滴定基本上是分析不出来的,但比色可以