搜搜做题作业网如何扩增cDNA oligo(DT)反应条件
来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/07/27 10:27:39
直接发送给我,我帮你设计.
1.如果是非特异性扩增引起的无法扩增目的条带,那么可以提高退火温度,或者换酶,或者先切胶回收较浅的目的条带,再次扩增2.如果退火温度太高,可以用两步法扩增3.如果引物GC值太高,可以加DMSO再问：条
ATCG.原理就是体外环境模仿人体内环境,完成人体内的DNA复制,大概就这样.
直接双向测序,根据测序峰图就能判断了
试试吧.退火温度低一些50左右
把这段基因输入设计软件里,调节引物位置,使变性温度在94度,退火温度=Tm-（5到10度）延伸温度72度左右,满足这些条件基本就可以了,当然还要根据实际情况多次实验得到最佳引物.如果你要扩增整个的基因
若是根据已知序列扩增未知物种的相应序列,可以根据先根据已知序列进行Blast搜索,发现其他同源序列,保存后进行比对,找出其中较保守区域,并根据Primer或Oligo等软件对某条序列进行分析,搜索其中
我觉得博凌科为网站上应该提供这些试剂的说明书,像TAKARA那样就比较详细.要购买之前可以先看说明书,而不是先买了试或者咨询.
博凌科为的长片段PCR扩增试剂盒所用的酶是Taq聚合酶和有校正功能的聚合酶的混合酶,这种混合酶可以染色体和其它细胞器的DNA为模板高效进行PCR反应.在人的染色体上可以扩增出27kb的DNA片段,而以
产品简介本试剂盒采用独特的缓冲体系,包含了快速制备基因组DNA和PCR扩增的所有试剂,适用于从植物组织、种子、细菌和动物组织一步法提取基因组DNA并用于PCR扩增.整个提取过程无需液氮研磨,无需有机溶
周围是否有其他基因?是否有保守基因,选择保守基因部分的序列进行扩增
这个你应该看仪器说明书啊,而且一般送货上门后有人会指导的啊.
PCR扩增的目的基因可以跑电泳后,把目的DNA带纹切下来,回收就可以了；阳性克隆的目的基因,可以先对这个克隆液体培养后提取质粒（如果是重组在质粒载体上的）或染色体（如果是YAC之类的）,酶切后电泳,回
博凌科为-为你回答之前,提醒你注意一个问题,那就是先要搞清楚gene的大致概念.一般而言,一个完整gene是有起始密码子和终止密码信息的,还有各种已知的其他预示结构,所以1.不管哪个序列,你能找到起始
在电泳的时候加上DNA的分子量marker,一般16S的大小都是1.5kb吧（很久不做了,记不太清楚）.如果有明显的目的条带而且大小也合适的话那就一般不会错,如果想要确定,可以将条带从胶中切下来,回收
2个办法1.直接使用提纯试剂盒,去掉其他成分,或者跑胶后切胶提纯2.克隆到载体质粒,再进行其他操作
PCR(聚合酶链式反应）是利用DNA在体外摄氏95度时解旋,55度时引物与单链按碱基互补配对的原则结合,再调温度至72度左右DNA聚合酶沿着磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互补链.由PCR技术制造
Pfu是DNA扩增过程中,保真性最高,出错率最低的高温DNA聚合酶.基因片段用Pfu扩增得到的产物为平末端,直接克隆比较困难.DNAPCR扩增：用Pfu进行高保真PCR扩增,50ul反应体积,一般扩增
可分为长产物片段和短产物片段两部分.短产物片段的长度严格地限定在两个引物链5'端之间,是需要扩增的特定片段.短产物片段和长产物片段是由于引物所结合的模板不一样而形成的,以一个原始模板为例,在第一个反应
PCR扩增出目的片段,需要自己提取模板,可以是RNA,或者DNA.引物会结合模板,如果特异性不够好,比如引物与模板的其他位点结合,在PCR过程中就会产生很多不同条带.