492nmbca法测蛋白浓度
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/08/07 20:58:58
转基因食品是利用新技术创造的产品,也是一种新生事物,人们自然对食用转基因食品的安全性有疑问.其实,最早提出这个问题的人是英国的阿伯丁罗特研究所的普庇泰教授.1998年,他在研究中发现,幼鼠食用转基因土
这要看你用什么做空白.若是用水来调零,曲线过原点是因为你的对照吸光值为o.一般情况下,即使对照也有吸光值,所以用水来调零,一般标线不会过原点的.若是用不加蛋白的反应液调零,理所当然,你的O蛋白的点就是
人体血浆浓度维持着人体组织液与血浆之间的渗透压平衡.当人体的血浆蛋白浓度降低时,就会出现组织液浓度大于血浆浓度,使血浆中的水分转移至组织液中,以降低组织液浓度使渗透压重新平衡.然而这样一来,就造成了组
你加入的试剂的量是否一样,比如考马斯亮蓝的体积之类的.再问:考马斯亮蓝的体积是一样的,其他试剂的体积严格按照表中用移液器加入的再答:个人觉得如果你的步骤完全正确,那么吸光度在0.097-0.229之间
一个是化学分析,一个是仪器分析一个是绝对误差大但相对误差小一个是绝对误差小但相对误差大
你用标准的已知浓度的BSA溶液配几管不同浓度的,然后在分光光度计上测出来,把读数跟已知的浓度做一个曲线(有可能是直线),这就是你的标准曲线然后再测你的目标样品的浓度,用读数在标准曲线上找到对应的真实浓
westernblot检测是用特定抗体检测特定蛋白,BCA法是检测蛋白浓度,即使BCA法检测蛋白浓度高,但也不一定有你检测的蛋白啊?还有你要保证你westernblot操作没问题哦,最好做个内参.
必须的,非离子表面活性剂会干扰BCA的测定结果.具体的原因应该是非离子表面活性剂的存在会影响Cu和蛋白质的结合.不过皮尔斯的MicroBCA据说不受非离子表面活性剂影响.不过你的膜蛋白没有去污剂好溶解
Bradfordassay的线形关系有一定限制,在2µg/ml到120µg/ml之间才存在线形关系.你首先要确定你的稀释倍数是不是符合标准.另外,就是蛋白质本身的氨基酸构成了.
试剂A:1%BCA二钠盐,2%无水碳酸钠,0.16%酒石酸钠,0.4%氢氧化钠,0.95%碳酸氢钠.混合调PH值至11.25.试剂B:4%硫酸铜.蛋白质标准液:用结晶牛血清白蛋白根据其纯度用生理盐水配
理论上盐浓度不影响分子筛柱子的色谱过程.但是实际上盐浓度可能影响蛋白的构象,从而一定程度上影响蛋白的形状和蛋白蛋白间的相互作用,所以对实际的分离分析还是有影响的.
首先原理差不多,具体细节差异还是有的.跑DNA的话,可以参见人家做AFLP的protocol,当然也要看你想分离的片断大小咯.两者都要用到丙烯酰胺、甲叉丙烯酰胺、TEMED、APS(10%)但是跑DN
1.把标准品的浓度和对应吸光值输入到excel里面,如果酶标仪直接有导出功能的话,直接导出到excel里面就行.2.选中浓度和吸光值,插入散点图3.选择任意一个点,点右键,选择添加趋势线4.在分析类型
先将以有机溶剂提取的待测样品作进一步纯化,充分除去有机溶剂;然后以水或氯化钠溶解,同标准曲线法测定样品液的OD值.
标准品就是纯的那个蛋白用来做一个不同浓度梯度下的标准品曲线这样你测出来的吸光度再对照标准品曲线去换算浓度是多少
需要纯净水稀释
一般不用测用内参来半定量就可以了缓冲液是为了帮助蛋白迁移呗再问:谢谢您!用相同浓度的样本点样是不是更好点谢谢!再答:那肯定的不过只要相差不大就没关系因为最后定量的时候都要比上内参的
是的,血浆蛋白是多种蛋白质的总称
既然是已知蛋白,当然是紫外比色测定最为简便可以标准品对照,也可以双波长比色法测定
题目不太清楚.你的样品是什么?会不会不纯含有其他蛋白.染色方法对不对?如果所需验证的蛋白含量很少,银染分辨率比考然高.会不会跑胶跑过头了?